课题来源:科技部
课题名称:灵长类动物脑细胞和神经回路的特异性光学标记
课题编号:2015CB755601
课题负责人:徐富强
课题摘要:发展一套适用于灵长类大脑细胞和神经回路研究的病毒标记新技术和新方法,针对猕猴黑质-纹状体脑区(正常与疾病)相关回路进行病毒标记技术和方法的验证。主要研究内容:(1)细胞类型特异性标记:结合CRISPR/Cas等技术和病毒载体介导转染技术,筛选细胞类型特异(如多巴胺能神经元)表达的基因位点,实现特异、定点、靶向的基因敲入,从而实现细胞类型特异的标记。(2)病毒高效标记神经回路:筛选改造能标记灵长类动物神经回路的病毒,研究改进包装体系,增加病毒包装产量和病毒滴度等。感染灵长类动物的病毒(如脑炎病毒等)的筛选、减毒和改造。(3)构建逆向、顺向的跨突触级数可控的标记系统。(4)神经回路连接节点——突触的靶向、特异标记:以感染灵长类动物的工具病毒为载体,表达不同的荧光蛋白标记神经回路的连接路线和连接节点。